《植物生理学报》 2007, 43(4): 701-704

拟南芥中一种AtBAG4 蛋白的抗体制备和特异性检测

刘红，邓丽，刘贵明，李文双，杨万年*

华中师范大学生命科学学院，武汉430079

通信作者：杨万年；E-mail: yangwnwn@163.com；Tel: 027-67863098

摘　要：

以拟南芥 AtBAG4 的全长 cDNA，构建 pET-51780 重组质粒，转化大肠杆菌 BL21 (DE3)，IPTG 可诱导融合蛋白 高效表达，表达产物以可溶形式存在；经 Ni-NTA 层析柱分离纯化，可得到分子质量约为 49 kDa 的 PAGE 纯蛋白。用纯 化的融合蛋白 pET-51780 免疫家兔，可得到抗 AtBAG4 抗体。Western blot 结果显示该抗体能特异识别原核系统内表达 的抗原以及拟南芥自身的抗原。

关键词：拟南芥；AtBAG4 基因；原核表达；多克隆抗体

收稿：2007-04-05   修定：2007-05-23

资助：国家自然科学基金(30570156)。

拟南芥中一种AtBAG4 蛋白的抗体制备和特异性检测

刘红，邓丽，刘贵明，李文双，杨万年*

华中师范大学生命科学学院，武汉430079

Corresponding author: ; E-mail: yangwnwn@163.com; Tel: 027-67863098

Abstract:

以拟南芥 AtBAG4 的全长 cDNA，构建 pET-51780 重组质粒，转化大肠杆菌 BL21 (DE3)，IPTG 可诱导融合蛋白 高效表达，表达产物以可溶形式存在；经 Ni-NTA 层析柱分离纯化，可得到分子质量约为 49 kDa 的 PAGE 纯蛋白。用纯 化的融合蛋白 pET-51780 免疫家兔，可得到抗 AtBAG4 抗体。Western blot 结果显示该抗体能特异识别原核系统内表达 的抗原以及拟南芥自身的抗原。

Key words: 拟南芥；AtBAG4 基因；原核表达；多克隆抗体